产品简介:

用 LiAc 转化法进行酵母转化时，会通过使用 carrier DNA，选用对数期的酵母菌，优化质粒 DNA 的质量和浓度等方法来提高转化效率。YPD Plus 用于转化后复苏酵母菌，可以有效提高转化效率 50-100%。

使用方法:（转化步骤具体可参考购买感受态使用说明或者感受态制备试剂盒，转化步骤反应体积可能略有差异）

一、1.5 mL 体系：

1、在含有约 1 μg 质粒的 1.5 mL 无菌离心管中，加入 5 μL 预变性的 Carrier DNA，50 μL 酵母感受态细胞，350 μL LiAc/PEG3350 混合液轻柔混匀。

2、30℃水浴或者金属浴 30 min，每 10 min 混匀一次。

3、每管加入 20 μL DMSO，轻柔混匀。

4、42℃水浴热激 15 min，每 5 min 上下颠倒混匀一次。

5、1000 g 离心 5 min。

6、弃掉上清，用 1 mL YPD PlusLiquid Medium 重新悬浮，30℃摇床震荡培养 30-60 min。

7、1000 g 离心 5 min。加入 1 mL 无菌 0.9%NaCl 重悬菌体。

8、分别稀释 10 倍，100 倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。

9、30℃恒温培养 3-5 天。

二、15 mL 体系：

1、在含有约 5-15 μg 质粒的 15 mL 无菌离心管中，加入 20 μL 预变性的 Carrier DNA，600 μL 酵母感受态细胞，2.5 mL LiAc/PEG3350 混合液轻柔混匀。

2、30℃水浴 45 min，每 10 min 混匀一次。

3、每管加入 160 μL DMSO，轻柔混匀。

4、42℃水浴热激 20 min，每 5 min 上下颠倒混匀一次。

5、1000 g 离心 5 min。

6、弃掉上清，用 3 mL YPD Plus Liquid Medium 重新悬浮，30℃摇床震荡培养 90 min。

7、1000 g 离心 5 min。根据实验需求加入相应体积的无菌 0.9%NaCl 重悬菌体。

8、涂布于相应的缺陷型培养基上。

9、30℃恒温培养 3-5 天。

储存条件:

-20℃储存，有效期 12 个月。