■ 产品介绍
SURE（Stop Unwanted Rearrangement Events）感受态细胞是设计用来克隆在传统菌株中无法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受态菌株缺乏催化重组和删除非标准二级结构和三级结构， 例如十字形（由反向重复序列导致）和Z字形的DNA序列的组件。这些非标准二级结构和三级结构在真核细胞中经常出现，而且这些结构能够阻碍真核细胞DNA 在传统菌株中的克隆。sure感受态细胞是限制性内切酶阴性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-)，核酸内切酶（endA）缺陷，和重组酶(recB recJ)缺陷的。同时sure感受态细胞中所具有的F' 游离基因上面的lacIqZΔM15基因，使得能够利用蓝白斑进行克隆筛选。 |
基因型： | E. coli B e14-(McrA-) Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 endA1 gyrA96 thi-1 supE44 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5 (KanR) uvrC [F' proAB lacIqZΔM15 Tn10 (TetR)]. |
■ 产品特点
SURE感受态细胞主要是用来克隆不稳定DNA结构，大肠杆菌DNA修复系统会针对重复序列、二级结构（如Z-DNA）等真核DNA进行重排或删除修饰。SURE感受态细胞针对uvrC,umuC,SbcC和RecJ等参与修饰的大肠杆菌基因或蛋白进行突变，提高了真核来源、不规则DNA的稳定性达20倍以上，并且适合克隆甲基化DNA。
本身具有Kana和Tet抗性。当转化氯霉素抗性质粒到sure感受态细胞中时，一定要用100μg/ml的氯霉素平板去筛选。因为sure感受态细胞在40μg/μl的氯霉素条件下具有抗性，而对于100μg/μl的氯霉素抗生素具有敏感性。
sure感受态细胞可以用于蓝白斑筛选，具有laz互补基因。
在载体构建过程中，我们经常会遇到一些基因片段具有高度的重复，这导致插入载体中的序列可能会在细菌扩增中不稳定，在质粒扩增中产生形成片段的缺失和重排，如发现插入片段高频率地产生缺失和重排，可以尝试使用重组缺陷大肠杆菌菌株，例如sure感受态细胞。
■ 使用方法
建议超净台内划线涂板，得到单克隆后再进行其他实验操作，避免杂菌污染。
■ 注意事项
1. 本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌时可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。
