■ 产品介绍
Rosetta-gami系列菌株来源于Origami系列宿主菌，该系列菌株的有点除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠蛋白的高效表达，同时含有Rosetta系列菌株中含有的真核细胞稀有密码子。该菌株同时集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的优点。Rosetta-gami(DE3)pLysS系列菌株含有pRARE质粒，能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个真核细胞中的稀有密码子tRNA，能够有效提升真核细胞蛋白的表达水平。pRARE质粒具有氯霉素抗性。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素，卡那，链霉素和四环素四种抗生素抗性。Rosetta-gami(DE3)pLysS被建议使用于含有Bla标记的氨苄抗性表达质粒。当使用pCDF系列载体时，还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。菌株中 的rpsL突变使得该菌株具有链霉素抗性DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。含有pLSs质粒，pLySs质粒能够产生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。 |
基因型： | Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL(DE3) F´[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB::kan pLysSRARE2 (CamR, StrR, TetR) |
■ 产品特点
Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株聚合了不同原核表达菌株的优势：
■ Rosetta-gami赋予其 Rosetta和Origami的优点——补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)对应的tRNA，提高外源基因的表达水平，并且包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性。
■ 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)适合T7启动子诱导的蛋白表达。
■ 该菌株携带的pLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株具有卡那霉素，氯霉素，链霉素，四环素抗性，为亮氨酸生长缺陷型菌株。
■ 使用方法
建议超净台内划线涂板，得到单克隆后再进行其他实验操作，避免杂菌污染。
■ 注意事项
1. 本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌时可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。
