■ 基本信息
别名: | pUC-19 |
启动子: | Lac/lac promoter |
复制子: | pUC |
质粒分类: | 大肠杆菌载体；克隆质粒 |
质粒大小: | 2686bp |
质粒标签: | LacZ |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度 |
5'测序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
3'测序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
备注: | 蓝白斑筛选 |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA |
片段物种: | 空载体 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: | |
荧光标记: |
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■ 质粒简介
pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ，是最常用的质粒载体，其结构组成紧凑，几乎不含多余的 DNA片段，GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来，其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 。这两个质粒的结构几乎是完全一样的，只是多克隆位点的排列方向相反。这些质粒缺乏控制拷贝数的 rop 基因，因此其拷贝数达 500-700 。 pUC 系列载体含有一段 lacZ 蛋白氨基末端的部分编码序列，在特定的受体细胞中可表现 α-互补作用。因此在多克隆位点中插入了外源片段后，可通过 α-互补作用形成的蓝色和白色菌落筛选重组 质粒。pUC18、pUC19载体适合于DNA片段的克隆、进行DNA测序、对外源基因进行表达等。由于在lacZ领域中含有多克隆位点，因此在以lacZ缺欠细胞作为宿主 (如：JM109等) 进行转化后，在含有IPTG、X-Gal 的平板培养基上进行培养时，可以很容易地通过蓝白筛选，判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因，对插入载体中的DNA片段进行测序等。进行DNA测序时，可以方便地使用M13系列的通用引物。
质粒只保证关键序列正确，不保证表达效果。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列可参考（具体以测序为准）下载：
ZK102 puc19.txt
