■ 基本信息
别名: | pET41c |
启动子: | T7 |
复制子: | pBR322 |
终止子: | T7 terminator |
质粒大小: | 5934bp |
质粒标签: | N-GST, N-6×His, N-Thrombin |
原核抗性: | Kan |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37℃，有氧，LB |
表达宿主: | BL21(DE3) |
诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
5'测序引物:
| T7:TAATACGACTCACTATAGGG
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3'测序引物: | T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF
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片段物种: | 空载体
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原核抗性: | Kan |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
pET41系列载体是设计用来克隆和高水平表达蛋白质的载体，载体融合表达一个含有220个氨基酸的GST标签蛋白纯化片段。pET41a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。
pET-41a载体上面含有一个EK蛋白酶切位点，当将目的基因使用载体上面的PshAI限制性内切酶位点插入进去时，可以通过EK蛋白酶将载体上的融合的所有氨基酸序列包括GST标签序列，全部切除掉。
质粒只保证关键序列正确，不保证表达效果。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列请下载：
ZK179pET-41c大肠表达质粒.txt
